La digitalización en el recuento de microbios en salas limpias
Los métodos manuales tradicionales para el recuento de microbios en el control de la limpieza de las salas limpias se han mantenido relativamente constantes a lo largo de los años, pero ¿qué está cambiando en esto?
Las pruebas de enumeración microbiana en el laboratorio de control de calidad farmacéutico se basan en métodos manuales tradicionales bien probados que han cambiado poco desde la creación de la primera farmacopea. Estos procesos manuales dependen en gran medida de la formación, la experiencia y el juicio de las personas que los realizan.
Se han introducido mejoras en los procesos para minimizar la variación, como el uso de medios comerciales, incubadoras validadas, firmas de verificación y registros electrónicos de lotes; sin embargo, en el fondo, la capacidad de ver y enumerar con precisión las colonias y luego registrar con precisión la información en papel o en un sistema electrónico sigue siendo un eslabón débil en el rastreo de datos forenses.
Sigue siendo uno de los pocos procesos de control de calidad en los que la recogida de muestras, el procesamiento y la obtención de resultados, seguidos de la eliminación de los datos brutos finales, pueden realizarse sin supervisión ni trazabilidad.
A esto se añaden las presiones sobre el personal para que entregue rápidamente resultados que cumplan con la normativa. Todos los factores se suman para crear dos escenarios de alto riesgo para la integridad de los registros.
Los sellos de tiempo de cada recuento permiten a los revisores determinar si se dispuso de tiempo suficiente para realizar un recuento preciso de las colonias
En primer lugar, la preparación y el transporte de las muestras, y en segundo lugar, la etapa de incubación, enumeración y transferencia de datos. Esta última parte tiene que ver con la integridad de los datos para su discusión en este documento y la «facilidad para auditar el proceso» desde el punto de vista del revisor/auditor.
Hasta hace poco, los métodos microbiológicos rara vez se han aplicado con tecnologías automatizadas.
Un cambio de juego normativo
Aunque la norma 21CFR211.194 exige que los registros originales sean revisados en cuanto a «exactitud, integridad y cumplimiento de las normas establecidas», las deficiencias en el estado actual (histórico) de los métodos microbiológicos manuales han quedado expuestas con el mayor enfoque en la integridad de los datos por parte de los reguladores en la última década.
Dos documentos centrados en la integridad de los datos de la MHRA y la FDA, entre otros organismos reguladores, hacen hincapié en la importancia de comprender los riesgos del proceso y mitigarlos hasta niveles aceptables. Los procesos manuales son difíciles de mitigar, ya que requieren que las personas los sigan y dejan pocas pruebas de incumplimiento que se descubran después.
Se proporcionan una lista de riesgos en el laboratorio microbiológico, aplicable a la mayoría de las pruebas compendiales realizadas. Las pruebas microbiológicas con mayor riesgo de problemas de integridad de los datos son: la prueba de esterilidad, el ensayo de endotoxina bacteriana del lisado de amebocitos de gel (LAL) y cualquier prueba de enumeración microbiana que implique el recuento de colonias microbianas, que abarca la mayoría de las demás pruebas compendiales.
El informe técnico 80 de la PDA ofrece una serie de observaciones sobre la integridad de los datos, como el muestreo, los recipientes de las muestras y el almacenamiento previo a la prueba, el uso excesivo de desinfectantes, el muestreo inexacto debido a un mantenimiento y calibración inadecuados del equipo. Recomiendan que las placas se conserven después del recuento para permitir la verificación de una segunda persona para descartar problemas de integridad de los datos.
Los reguladores seguirán examinando de cerca las operaciones y los datos de los laboratorios, para garantizar que los valores de las pruebas notificados sean precisos, completos y fiables. Garantizar que se siguen los procesos requiere un nivel de revisión adicional al que se ha aplicado anteriormente a los procesos manuales. Esta revisión adicional añade exigencias adicionales a los microbiólogos de alto nivel y añade tiempo al proceso de publicación.
El estado actual: recuentos de placas microbianas
Además de los riesgos para la integridad de los datos que entrañan las técnicas manuales, las horas de trabajo en la mesa del laboratorio pueden crear fatiga en el usuario, lo que se traduce en una reducción de la precisión y exige descansos de los analistas. La fatiga puede reducirse añadiendo analistas adicionales, pero esto requiere una importante inversión de tiempo en formación y un esfuerzo continuo por parte de todos los analistas para ser coherentes.
En una revisión de 2020 sobre el recuento de colonias microbianas, se informó del resultado de un estudio en el que dos analistas diferían en los recuentos hasta en un 50% cuando contaban cuentas en agar para representar las colonias. Además, describe otros factores que influyen en la capacidad de un analista para contar eficazmente las placas, como la posición de las placas, el tipo y la dirección de la iluminación.
Además de los retos anteriores, los resultados del recuento de placas sólo pueden conservarse y ser revisados por una segunda persona durante unas horas, tras las cuales los recuentos totales pueden cambiar debido a la aparición de organismos de crecimiento lento, a la propagación de organismos o a la contaminación del proceso de lectura de las placas. En el pasado, era habitual que el personal del laboratorio revisara la documentación de los recuentos de placas y no las propias placas, optando por aceptar el riesgo de recuentos inexactos. Debido a la preocupación por la integridad de los datos y a las citaciones reglamentarias por recuentos inexactos de placas, los laboratorios deben ahora implementar la revisión de todas las placas por una segunda persona o encontrar tecnologías alternativas para llevar a cabo los métodos.
Además de las limitaciones de tiempo para la retención de la muestra original, los sellos de tiempo contemporáneos para el inicio/final de cada recuento permiten a los revisores determinar si se permitió el tiempo suficiente para un recuento de colonias preciso, pero rara vez se registran en los recuentos manuales.
Los procesos manuales son difíciles de mitigar, porque requieren que las personas los sigan
Por ejemplo, una carta de advertencia de la FDA a Hospira Healthcare India en marzo de 2019, declaró: «Su empresa también declaró que, después de implementar la supervisión adicional de la lectura de placas en el laboratorio de microbiología, surgió un aumento notable en los recuentos en los resultados del monitoreo ambiental, con un aumento particularmente «agudo» en las excursiones de monitoreo del personal en toda la instalación.»
Por el contrario, las tecnologías actuales de recuento automatizado de placas ofrecen capacidades sin precedentes para mejorar la coherencia, ahorrar tiempo, reducir la fatiga de los analistas, capturar los datos de forma automática y totalmente intacta, y controlar el acceso de los revisores con una documentación infalible.
Avanzar: la digitalización
La clave para mitigar los riesgos microbiológicos, aumentar la eficiencia y reducir los problemas ergonómicos se encuentra en el uso de sistemas digitales. Los sistemas digitales ofrecen la posibilidad de tener las manos libres y de realizar un análisis consistente de las placas, la capacidad de guardar una imagen de la placa en el momento del análisis y la posibilidad de guardar un registro completo de las pruebas, ya sea que las aprueben, las suspendan o las invaliden.
En Isobox Systems, apostamos siempre por las últimas tecnologías, por la innovación y por la búsqueda de soluciones y mejoras a los procesos actuales. Por ello, mantenemos un constante estudio y seguimiento del sector de salas limpias desde cualquier perspectiva.